资源和教程

ESI质谱(MS)最早是由Yamashita和Fenn1在1984年发表的，但它是基于Dole、Iribarne和Thompson的早期工作。1996年，维尔姆和曼恩发表了纳米电喷雾技术，增加了ESI MS的使用，特别是在样品浓度或体积受限的情况下。针对ESI的机理提出了两种理论:电荷残留模型和离子喷射模型。在带电残留模型中，当溶剂蒸发时，液滴的总电荷保持不变，它留在非挥发组分上。在离子喷射模型中，溶剂从液滴中蒸发，直到库仑斥力克服了液滴的表面张力，单个离子被排出。在任何一种情况下，产生的离子都是高电荷的，并且每个离子都有一个电荷数分布(称为电荷态分布)。对于生物分子如多肽和蛋白质，电荷是通过质子化或去质子化引入的。

样品制备

感兴趣的分析物通常溶解在水溶液中，并与等量的挥发性有机溶剂混合。然后将该溶液装入纳米祈祷发射器进行单样品分析，或者在电喷涂之前对其进行液相色谱分析(LC-ESI MS)。

样品的分析

使用ESI针和孔板之间的电压差喷洒每个样品。在某些情况下，使用反压或护套气体来帮助喷雾的雾化。在这种仪器中，电喷雾电离是在大气压下进行的。然后，离子被引入到真空使用几个直接光学，而溶剂和其他中性分子被排除使用撇脂。在这个特殊的仪器中，离子通过四极(记为主束)传输和聚焦;然后，利用正交飞行时间(TOF)质谱仪进行质量分析。串联质谱(MS/MS)也可以在主束流中使用碰撞诱导解离(CID)进行，因此该仪器主要用于肽测序。

• 林毅夫(译)。电喷雾离子源。这是免费飞机主题的另一种变体。期刊。88年化学,4451 - 4459。

MALDI MS最早由Michael Karas和Franz Hillenkamp1在1985年发表，当时他们在激光解吸MS实验中使用色氨酸作为其他氨基酸的基质。田中浩一的研究小组偶然发现，将样本与金属粒子混合，可以分析大分子，如完整的蛋白质。1988年，两组发表了MALDI质谱在完整蛋白上的应用，分别使用精细金属颗粒2和有机酸s3作为基质。

样品制备

将感兴趣的分析物溶解(通常在水溶液中)并与大量过量的基质(1000:1到10000:1)混合。该基质通常是有机酸，如苯甲酸或肉桂酸的衍生物，但其他化合物也起作用。少量的这种混合物(0.5 - 1.0微升)沉积在不锈钢样品台上，然后让空气干燥。校准时，可将内部标准放入基体溶液中，或在附近放置其他点进行外部校准。

样品的分析

样品沉积物干燥后，板通过真空室联锁放置在仪器中。各试样照射的脉冲激光的氮（波长= 337纳米），以在气相（解吸/电离）离子。的质荷比（M / Z）使用的是轴向TOF质谱仪来测量。离子可以以线性模式（更高的灵敏度，但较低的分辨率），或在反射模式（较低的灵敏度，但较高分辨率）来检测。

• Karas, M.， Bachmann, D.和Hillenkamp, F.(1985)。波长对高辐照度紫外激光解吸质谱分析的影响。肛交。化学57岁,2935 - 2939。
• 田中基，Waki, H.， Ido, Y.，秋田，吉田，Y.，吉田T.(1988)。用激光解吸飞行时间质谱分析蛋白质和聚合物可达10万m/z。快速Commun。质谱仪，2,151 -153。
• (2002)。分子质量超过10000道尔顿的蛋白质的激光解吸电离。肛门化学。60,2299-2301。

理论背景

离子在离子源中使用高电压(20 - 25kv)快速加速。在这个初始加速度之后，离子在场自由区漂移，直到它们与探测器相撞。

Ep = q * V

• 在电场中的带电粒子的势能是通过在该粒子（Q）的电荷决定乘以电压（V）的大小。这种势能转化为动能。

埃克=½mv²

• 粒子的动能等于乘以（V）除以2的速度的平方的粒子（M）的质量通过设置势能和动能相等，则“时间飞行方程”罐被简单地示出：EP = EK

QV =½mv²

• 然后，用距离除以时间(d/t)代替速度。

QV =½m（d / t）的²

2V = MD²/ qt²

（2VT²）/（d²= m/q = m/z

• 因此，可以测量每个离子的质量-电荷比。

数据采集

Spectra是瞬态记录收购。来自检测器的信号的量，每次照射后的时间记录在。最终的质谱被呈现为平均个体时间记录的。在这些光谱中，它要考虑峰的信噪比（S / N）是很重要的。离子信号以S差/ N值可能不可靠的;在另一方面，它防止检测器饱和，如果较低质量离子信号的S / N值太高，这将发生非常重要。此外，S / N值必须被仔细监测同位素比率测量。