标准的原核的注射
当外源DNA被注入受精卵的原核时,就可以整合到基因组中,结果产生的小鼠通常会在每个细胞中携带转基因的副本,包括生殖细胞。整合到基因组中的转基因的数量可以在整合的拷贝数和整合的方向上有所不同。
GEMF服务
由研究人员提供并由该设施纯化的DNA结构将被注射到受精卵中,并转移到培育的雌性小鼠的输卵管中。由此产生的幼崽有可能是转基因的,并将被转移给研究人员进行分析。
成本
MD Anderson的调查人员每建造一个2250美元;MD安德森下属的调查人员每建造一个$3,700;其他外部调查员每人6000美元
原核注射时间线
- 第一天:微注射DNA
- 第19天:幼崽出生
- 第33天:调查者通报了出生人数,男女人数。调查员负责在这个时候把这些老鼠的动物订单表格交给兽医
- 第45天:断奶并将所有注射出生的幼犬转移给研究人员(在收到兽医局签署的命令后)
从GEMF获取服务
- 从研究管理办公室获得动物研究授权(动物协议协调员分机2-3220188bet体育网址)。没有授权的动物研究协议号,实验室不能进行任何实验。188bet体育网址
- 预约Jan Parker-Thornburg(713-745-2654),或者发电子邮件jpthorn@mdanderson.org),以确定注射日期和如何制备质粒DNA的方案
- 证明在基因组DNA背景中检测感兴趣基因的单个副本的能力。确定复制水平标准的协议可以在密歇根大学的TAMC找到转基因复制标准网站。有关如何将这些标准纳入PCR或Southern分析的方案,请参阅PCR分析.
- 登录到https://mdanderson.ilabsolutions.com,注册一个帐户,然后去网站请求服务
在核注射和植入完成,幼犬出生后,PI必须进行尾部分析,并将结果传递给设施。所有幼崽将被转移到调查员的栖息地。调查人员必须获得并填写动物订单兽医局动物订单表。
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