从胚泡产生ES细胞
GEMF现在能够产生来自胚泡的新型ES细胞系。该技术将使研究者能够从其独特的小鼠中获得ES细胞,以进行进一步的遗传操作或内部测试。
GEMF服务
我们将超排卵5 - 10只野生型或纯合子雌性(PI提供),并将它们与研究人员提供的雄性交配。胚泡将被分离并生长以获得内部的细胞团块。然后将ICM分离获得ES细胞。胚胎干细胞系通常是从大约10%的囊胚分离出来的。根据实验结果,这些细胞系可以被送去做细胞学检查,然后注射(需要额外的费用)以确定生殖系的传播能力。我们不能保证能成功地获得种系传播。然而,我们将与调查人员合作,以取得积极的结果,以我们的能力。
成本
MD安德森调查人员5000美元;MD安德森附属研究人员8200美元;其他外部调查人员每建筑$13 284
ES细胞生成的时间线
- 第1天:用PMS处理雌性(野生型GEMF提供,纯合子PI提供)
- 第3天:将与HCG的相同的女性与PI提供的男性视为伴侣
- 第7天:PI工作人员将女性带到GEMF冷冻实验室。胚泡从雌性的子宫中冲洗出来,并被放置在6厘米的组织培养板上
- 第12天:检查胚泡过剩是否存在明显的内部细胞质量(ICM)。如果检测到定义的ICM,则在先前用饲养细胞接种的96孔板的孔中仔细解剖,轻微地屏蔽并镀在井中
- 在接下来的四到八周:每个井都经过仔细监测ES细胞殖民地的生长。井是胰蛋白酶化的,并根据需要移动到较大的板上以进行生长。此外,我们将增加2I和3i制剂(Li P.等等。2008个单元135:1299-1310;ying ql.等等。2008年自然453:519-523)根据需要鼓励ES细胞的生长
- 当ES细胞在6厘米的板上始终始终生长时,我们将冻结四个小瓶(通常在通道4-6)。我们将用等分的细胞提供PI以验证遗传组成,并可以为细胞遗传学分析提供一块细胞
- 如果PI希望建立细胞能够进行种系传动,我们还将将ES细胞注入胚泡(额外收费)进入胚泡(额外费用)
从GEMF获取服务
- 预约Jan Parker-Thornburg(电话:713-745-2654或发电子邮件)jpthorn@mdanderson.org)来回顾项目和实验的基本细节
- 登录到https://mdanderson.ilabsolutions.com.,注册一个帐户,然后去网站请求服务