服务
由于许可协议,ShRNA和ORF试剂可用于德克萨斯州MD Anderson癌症中心的研究人员。188bet体育网址如果您有任何疑问,请联系Yutong Sun,Ph.D.在ysun2@mdanderson.org..
甘油砧木和质粒的个体克隆分布
FGC将单个shRNA或ORF以甘油原液(含8%甘油的LB培养基)或质粒(midi-prep, >100ug)的形式分布。ORF质粒在释放给研究人员之前将通过部分测序进行验证。188bet体育网址甘油库存周转时间为2-4个工作日,质粒周转时间为3-5个工作日。
单个慢病毒或逆转录病毒的包装和转导
FGC进行质粒纯化、慢病毒或逆转录病毒包装和效价测定。如果研究人员向我们提供他们自己的病毒载体,我们也会提供这项服务。188bet体育网址周转时间为4-6周。
定制亚文库(甘油股票,质粒和/或慢病毒)
基于研究人员的需求,FGC将以96孔板格式“188bet体育网址樱桃挑选”shRNA或ORF甘油股。根据研究人员的要求,我们将以96孔188bet体育网址板格式纯化质粒(转染),和/或在96孔板中进行慢病毒包装。
使用CRISPR / CAS9技术建立体细胞基因敲除细胞系
FGC将提供细胞基因敲除细胞的多个克隆,并通过PCR(HR法)或测序验证基因敲除(NHEJ方法)。要求:1)细胞系可以容忍克隆选择;2)靶基因的丧失不会杀死细胞或显着降低细胞增殖率;3)细胞系与转染或转导;4)Western印迹(对于蛋白质),QPCR(用于非编码RNA)或其他测定可用于检测靶基因的损失。
项目服务
FGC员工将花费一些努力,以方便MD Anderson Cancer Center研究人员优化屏幕测定,执行屏幕和数据分析。188bet体育网址
其他服务
自定义shRNA或ORF亚克隆
FGC子克隆定制SHRNA进入PLKO.1载体,PGIPZ或PTRIPZ载体,或ORF进入表达载体。
共用设备
以下仪器对MD Anderson研究人员开放:机器人(Tecan EVO100和EVO200)和高内188bet体育网址容成像系统(Imagexpress Micro和Ultra)。
预组装的shRNA文库
FGC分布的预组装的shRNA库针对以下基因家族:人激酶;人类磷酸酶;和人E3连接酶。此外,我们还分发了Cellecta人类全基因组聚合shRNA文库(慢病毒)。
TKO v3 CRISPR文库
FGC分发TKO v3 CRISPR文库(慢病毒,多伦多大学莫法特博士的实验室,https://www.addgene.org/pooled-library/moffat-crispr-knockout-tkov3//).