流式细胞仪
FCCIC为所有仪器的分析流式细胞术提供辅助使用服务(按小时收费),包括BD LSR Fortessa、BD FACSAria™Fusion SORP和BD FACSAria™Fusion。辅助细胞分类也可在BD FACSAria™Fusion SORP和BD FACSAria™Fusion上获得。所有仪器均可接受培训和独立使用(折扣)。仪器培训是强制性的任何FCCIC用户谁将执行无辅助流式细胞分析或分类。服务费用各不相同,收费表可在iLab随着我们的服务申请表。请联系帕姆·惠特尼(pjwhitney@mdanderson.org)之前调度初始服务
服务和应用程序
分析流式细胞术
流式细胞术是细胞生物学研究中广泛使用的基础工具。188bet体育网址蛋白表达或细胞状态的特定指标可以同时测量单个细胞在更大的,异质性群体。该核心提供了先进仪器和专家人员的访问,以满足大多数任何研究人员的需要。188bet体育网址该中心专门使用BD LSR Fortessa 15参数细胞分析仪开发复杂的检测方法,定量检测细胞表面和细胞质抗原、细胞周期、细胞凋亡、“侧群”和荧光转基因表达(如GFP、YFP、RFP和BFP)。除了这个关键乐器,我们的FACSAriaTM仪器也可以用于更常规的流量分析应用。
细胞分类
FCCIC的细胞分选设备包括一个BD FACSAria™Fusion, 17参数,高速细胞分选机,用于在生物安全柜内处理≥BSL2样品,和一个BD FACSAria™SORP, 18参数,高速细胞分选机。该核心可以根据基于抗体的染色、荧光蛋白表达和活力指标的许多不同组合,分离出各种不同的细胞类型。使用BD FACSDiva™软件检测细胞,可以从单个异质样品中同时收集到1-4个试管中。
最新的软件版本允许索引排序,使研究人员确认从他们的实验参数定义的人群中收集的单个细胞的起源。188bet体育网址自动细胞分配单元能够分配单个细胞到96孔或384孔板中。样品室和收集装置被气候受控和气溶胶含有。
该核心还运营着一个默天旎的autoMACS Pro细胞分离器,这是一种免疫磁细胞分离系统,可用于富集或耗尽细胞群,然后在我们的BD仪器上进行分选。
精母细胞分类
其他服务
- 对所有仪器进行多参数分析和分类
- autoMACSpro可流动实验之前,细胞群的枯竭/富集
- 激光配置允许荧光蛋白的全光谱分析,核心人员常规使用10-12种颜色进行实验
- 分类成各种管和板
- 指数排序
- 指导与实验设计
- 对独立用户进行仪器培训
- 培训应用和使用FlowJo分析软件
训练
流核心建议用户第一次接触帕姆·惠特尼(pjwhitney@mdanderson.org)敲定任何计划实验前安排咨询。这次协商将提供最好的实验方法,最为理想的荧光面板输入,以及具体的实验设计,以确保有意义的数据的恢复以及服务的用户期望和成本项目的范围。
核心建议用户安排约会至少1周之前送达日期。提前计划将允许有研究者次增加选择对自己选择的工具。188bet体育网址
对于任何想要进行无辅助流式细胞术分析或分类的Flow Core用户,必须进行仪器培训。培训由Pam Whitney (pjwhitney@mdanderson.org)提供,并将包含多个天数的时间块。完成培训后,颁发结业证书。
核心人员还可以使用FlowJo软件协助进行数据分析,或者在时间允许的情况下,为特定项目进行分析,但需要支付额外费用。
请注意,每个用户都有责任归档自己的数据。核心人员可以帮助用户学习这种做法。
仪表
BD FACSAria™融合SORP
BD FACSAria™Fusion SORP是一个18参数,高速细胞分选机,由核心人员运行。该仪器为研究人员提供了分离和捕获活细胞亚群或单细胞188bet体育网址的能力,用于分子、遗传和/或功能分析。除了荧光抗体的制备外,该5激光仪器还可以区分许多荧光蛋白、干细胞和侧群。细胞由数字BD FACSDiva™软件检测,并从单个样品中同时收集到一个或多达四个管中。该仪器上的自动细胞分配装置能够将单个细胞分配到96孔或384孔板上。样品室和收集设备是气候控制和气溶胶包含。
BD FACSAria™融合
BD FACSAria™Fusion是一款16参数高速细胞分选机。它是主要的流量岩心仪器,由岩心人员操作。它为研究人员提供了分离和188bet体育网址捕获活细胞亚群或单个细胞的能力,用于分子、遗传和/或功能分析。该仪器为最佳的多色分析和细胞分选提供了卓越的灵敏度和分辨率。它的4激光允许用户区分许多荧光蛋白,荧光抗体制剂,和其他标记物,以确定干细胞和侧种群。细胞由数字BD FACSDiva™软件检测,并同时收集到一个或多达四个试管中。自动细胞分配装置将单个细胞沉积到96或384孔板中。增强的流稳定性提高了分选的纯度和效率,以帮助分离细胞的小亚群(如干细胞),用于后续的体外和体内实验。该仪器包含在生物安全柜中,允许分析人体标本,同时确保用户的保护。
BD LSRFortessa™
在BD LSRFortessa™是一个15-参数细胞分析仪。这是配有数字BD FACSDIVA™软件,通过4激光仪器。通过该仪器提供的功能包括基于表面或细胞内抗原,细胞凋亡和细胞周期参数的分析,和多参数分析的表达细胞亚群的定量。核心研究人员提供个性化的培训对B188bet体育网址D LSRFortessa™为无助的操作。
Miltenyi autoMACS®Pro分离器
所述autoMACS®临分离机由Miltenyi公司是一个自动化的高速免疫细胞分离系统,并以每次处理多个样本的能力。从几个物种和组织类型,包括全血多种细胞类型,可与autoMACS®临用使用免疫磁珠进行处理。细胞可以使用阳性选择,耗尽或触及隔离程序来分离。它可排序超过10万个细胞每秒从最多的采样以4×109个细胞。该仪器具有触摸屏和易于导航的菜单。该系统减少的样品和增加可重复性人工处理