组织形态学
按照ASBMR组织形态形态命名委员会(5)建立的指导方针,以单位测量和表达所有骨特异性参数。对于每个实验,将同时分析实验和对照样品,每组至少为15只动物,以最大限度地减少遗传变异性的影响。
最初,将分析仅通过von Kossa试剂(染色黑色矿化骨基质)治疗的每试样的四个部分。对于椎骨,将分析L3和L4。使用现有的半自动模式存在于骨质统计系统中,我们将测量三个参数:
骨卷
作为小梁骨(BV / TV,%)占据的总骨髓体积计算
小梁数
评估为分析骨骼体积的场中存在的小梁数(TB.N,MM-1)
小梁厚度
计算为为骨体积(TB.Th,μm)分析的场中存在的小梁的平均厚度
这些参数将提供实验标本中骨量增加或降低的存在的可靠估计。是否存在这种表型,将评估额外分析的必要性。细胞计数和动态组织形态学需要处理特定染色的附加部分和/或非常耗时。这些额外的分析只会根据项目调查员要求进行。
将在从两个非相邻部分获得的高放大镜图像的30-35个相邻的字段上执行细胞计数和动态组织形状。
测量结果如下:
成骨细胞将在甲苯胺蓝染色的载玻片上计数,因为蓝/灰色幼崽蛋白细胞在骨表面的簇中排列。骨赘(N.OB / BPM,MM)-1)和成骨细胞表面(OB.S / BS,%)数据将提供给调查人员。
骨核糖籽将计入测定陷阱活性作为捕获阳性多核细胞的载玻片。骨核苷酸号(N.oc / BPM,mm-1)将向调查人员提供骨壳表面(Orteoclast表面(OC.S / BS,%)数据。
表征骨骼形成的两个动态参数将提供给调查人员。矿物链接率(MAR,MM / Day)将被测量为两个连续的Calcein标签的中点之间的距离除以标记周期之间的时间间隔。骨形成率(BFR / BS,MM3./毫米2/天)将计算为新形成的矿化骨量的表达。