临床试验使用睡美人基因转移来制造CAR - T细胞
MD Anderson新闻发布，2013年12月8日
首次在人体内应用“唤醒”DNA序列系统修饰的T细胞，显示干细胞移植治疗白血病、淋巴瘤后无毒性
MD安德森新闻发布12/08/13
研究人员在第55届美国血液学学会(ASH)年会上报告称，首批临床试验使用睡美人基因转移系统定制免疫系统T细胞，以攻击特定类型的白血病和淋巴瘤，表明该方法是安全可行的。
“在这些临床试验进行了5个月后，在9名接受血液干细胞移植的患者中，使用转基因嵌合抗原受体(CAR) T细胞治疗没有发现急性或晚期毒性。”德克萨斯大学安德森癌症中心干细胞移植和细胞治疗副教授Partow Kebriaei医学博士说。
在治疗前从患者身上收集的T细胞经过修饰，以找到免疫系统B细胞表面的CD19受体，B细胞可以产生对抗感染的抗体。用于急性淋巴细胞白血病或b细胞淋巴瘤的造血干细胞移植后注入。
Kebriaei说:“在移植后给予CAR - T细胞以最小的残留疾病为目标，希望维持高风险B细胞恶性肿瘤患者的缓解。”
研究小组为25名患者准备了CAR - T细胞，其中9名患者接受了自己的血液干细胞、来自匹配捐献者的干细胞或来自脐带的干细胞。
在前5名患者中，3名接受初始最小剂量T细胞治疗的患者病情有进展，而第1名接受下一个最高剂量治疗的患者仍处于缓解状态。对接受脐带血移植的5名患者进行评价还为时过早。
4例非霍奇金淋巴瘤患者接受较高剂量的T细胞治疗，3个月后均处于缓解状态。
睡美人的优势
MD安德森的儿科教授Laurence Cooper博士说，与用于制造CAR - T细胞的重组病毒DNA传递方法相比，睡美人更快、更简单，因此对定制T细胞来说是一个更灵活的过程，而且更便宜。
库珀在佩里·哈克特博士发表的一项研究中读到了关于睡美人的内容。佩里·哈克特博士是明尼苏达大学遗传学、细胞生物学和发育学教授，也是这一过程的创造者。该系统之所以被命名为睡美人，是因为哈克特能够“唤醒”一种已经灭绝的转座子——一种可以自我复制并将其插入基因组的DNA——并将其与他想要转移到一种名为质粒的DNA分子中的基因包装在一起。
相应的转座子酶与质粒结合，将转座子和基因从质粒中切出，并粘贴到目标DNA序列中。
哈克特首先开发了用于鱼类基因转移的系统，然后将其应用到其他脊椎动物。
Cooper联系了Hackett，合作使用睡美人转座子和转座酶将一个基因插入T细胞，在T细胞上创造一个人工的或嵌合的抗原受体，识别并结合CD19, B细胞表面的一种细胞分子。
MD安德森的团队通过将睡美人/CD19质粒与患者的T细胞结合，并施加一个电场来放松T细胞膜，以促进基因转移。
然后用人工抗原提呈细胞培养这些修饰过的T细胞，这些抗原提呈细胞在反应增强剂白介素-2和白介素-21的帮助下刺激T细胞的膨胀。这些CAR - T细胞在28天内被取出，并被冷冻以备以后的输注。
这些电池现在是在MD安德森的良好制造工艺实验室制造的。库珀的终极目标是改进和发展这一过程，使CAR - T细胞可以现货供应，或者像血液和血小板一样在血库中预制。
这个想法源于儿童癌症治疗的匮乏
库珀为患有血癌的儿童提供治疗。针对儿童癌症的抗癌药物很少被开发出来，因为它们非常罕见。
库珀说:“在儿科方面，我们正处于这样一种情况:许多公司并没有真正关注儿科的需求，仅仅是因为对它们的投资没有回报。”“这取决于我们这些研究人员开发和实施治疗儿童癌症的方法。所以你必须问自己，‘我们能生产什么?’好吧，我们可以制造新的细胞用作药物。”
研究人员188bet体育网址开启了一项新的临床试验，在B细胞恶性肿瘤患者结束化疗后立即使用CAR - T细胞进行治疗。库珀说:“我们的目标是避免干细胞移植。”实体肿瘤试验的计划正在进行中。
这种方法的持续发展是在MD安德森的登月计划下进行的，以加快将科学发现转化为减少癌症死亡的临床进展的步伐。
与Kebriaei、Cooper和Hackett共同完成这项研究的是海伦·赫尔斯、哈吉特·辛格博士、西蒙·奥利瓦雷斯、马修·菲利奥拉、帕帕内肯·库玛尔、Bipulendu Jena博士、Sonny Ang博士和儿科学的Rineka Jackson;Doyle Bosque, Ian mc侄女，博士，Gabriela Rondon，医学博士，Chitra Hosing，医学博士，Elizabeth Shpall，医学博士，和Richard Champlin，医学博士，干细胞移植和细胞治疗。